子宫内胚胎电转技术目前被广泛应用于神经发育的相关研究。本文利用子宫内胚胎电转的方法对Frizzled10基因在小鼠大脑皮层发育过程中的作用作了初步的探讨。首先利用PCR扩增获得Frizzled10的全长cDNA, 将cDNA连接到电击载体pCAGIG,构建异位表达载体pCAGIG-Frizzled10。建立子宫内电击技术:在胚鼠E14.5天时,将异位表达载体pCAGIG-Frizzled10在电压35V、脉冲时间50ms、脉冲数5的条件下,将质粒电击到背侧皮质的脑室区。4天后收取胚鼠脑组织,进行冠状切片后在荧光显微镜下检测外源蛋白GFP在鼠胚背侧皮质的表达情况。结果显示,与对照相比,Frizzled10的异位表达参与了皮质发育的调控。该研究为我们进一步研究Frizzled10的功能提供了新的线索。 |